Условия хранения препаратов на основе ботулинического токсина

Ботулинический токсин — очень чувствительный яд, который легко подвергается денатурации с потерей токсичности.

Как правило, активность ботулинического токсина (который является внутриклеточной пептидазой) зависит от его пространственной конформации (структуры). Ботулотоксин типа А детоксифицируется при температурах выше 40 °C (особенно в щелочной среде), под влиянием различных химических веществ, а также при образовании пузырьков на поверхности раздела жидкость/воздух. Например, спирт не может быть использован для разведения препарата или очищения кожи перед инъекцией, так как вызывает денатурацию и нейтрализует токсин.

Разбавление комплекса токсина до низких концентраций, используемых в медицине, приводит к быстрой детоксикации ботулотоксина в отсутствие стабилизирующего агента. Разведение ботулотоксина из раствора, содержащего мг/мл токсина, до раствора, содержащего нг/мл, представляет значительные трудности из-за быстрой потери удельной токсичности при таком сильном разбавлении.

Для стабилизации ботулинического токсина используют белки животного происхождения (человеческий сывороточный альбумин и желатин). Однако наличие белков в конечном препарате представляет потенциальные проблемы из-за того, что некоторые стабильные вирусы, прионы и другие инфекционные или патогенные возбудители могут загрязнять ботулотоксин, найдя в препарате питательную среду.

Особенности восстановления (разведения) препаратов ботулотоксина

Сухая форма препарата ботулотоксина может быть восстановлена (переведена в форму раствора для инъекций) разведением при помощи стерильного физиологического раствора без консерванта (0,9 % раствор хлорида натрия).

Токсин очень чувствителен к механическим нагрузкам, теплу и рН, так что следует соблюдать осторожность во время разведения, чтобы не вызвать чрезмерного нагрева или турбулентности. Поскольку ботулотоксин денатурирует при барботаже или сильном встряхивании, растворитель осторожно вводят во флакон. Восстановленный Ботокс^® представляет собой прозрачную, бесцветную жидкость без твёрдых частиц.

Эффективность ботулотоксина может быть снижена низкими концентрациями токсина и наличием химических веществ в растворителе.

Для большей клинической эффективности, производители рекомендуют врачам использовать препарат в течение определённого срока после разведения в зависимости от бренда.

Условия хранения препаратов, содержащих ботулинический токсин

В таблице 1 представлены лицензионные условия хранения, принятые в настоящее время для трёх основных семейств продуктов.

Таблица 1. Условия хранения, лицензированные для различных брендов препаратов ботулинического токсина в крупнейших регионах мира (официальные данные)

*н/д — продукт недоступен в данном регионе

Первоначально Botox должен был храниться при температурах ниже -5 °C, тогда как Dysport всегда хранился при 2-8 °C. Для Botox теперь принят смешанный набор условий хранения: или ниже −5 °C или при 2-8 °C. Длительность срока хранения для Botox и Dysport составляет до 3 лет и 2 лет соответственно.

Xeomin может храниться при температурах ниже 25 °C. Уже с первого появления на рынке Merz заявил о повышенной температуре хранения Xeomin, опубликовав данные о температурной стабильности препарата. Сообщалось о кратковременном (до одного месяца) хранении препарата при температуре до 60 °C. Причина высокой термостабильности заключается в том, что семейство препаратов Xeomin содержит самую высокую концентрацию человеческого сывороточного альбумина (ЧСА) — в восемь раз выше, чем Dysport и вдвое выше, чем Botox. ЧСА является исключительно стабильным человеческим белком. Процесс производства ЧСА всегда включал стадию нагревания до 60 °C в течение 10 часов для инактивации вирусов. Высокая концентрация ЧСА в Xeomin, по-видимому, повышает устойчивость продукта к высоким температурам. Другие исследователи связывают термостабильность Xeomin с тем, что в отличие от других препаратов БТ типа А, он содержит только чистый нейротоксин без ассоциированных белков. Возможность хранения препаратов Xeomin при температурах до 25 °C (до 30 °C в некоторых странах, таких как Бразилия) расширяет возможности транспортировки, тем не менее она должна проводиться в контролируемых температурных условиях, как и других продуктов БТ.

Некоторые из новых формул с низким количеством единиц, такие, как Azzalure^® или Vistabel^®, имеют срок годности «родителей», то есть исходных продуктов.

Стабильность и условия хранения препаратов ботулотоксина после разведения

Стабильность продуктов ботулотоксина после разведения с использованием стерильного 0,9 % раствора хлорида натрия как рекомендуемого растворителя, также является областью коммерческого соревнования. Срок годности разведённых препаратов является переменным в зависимости от требований отдельных лицензирующих органов. Детали ряда лицензированных условий показаны в таблице 2.

Таблица 2. Условия хранения разведённых препаратов, лицензированные для семейств продуктов ботулотоксина в различных регионах мира

Восстановленный препарат нельзя замораживать. Замораживание может ускорить денатурацию ботулотоксина, значительно снижая продолжительность действия после инъекции. Показано, что частично денатурированный из-за неправильного хранения препарат Botox^®, будет по-прежнему оказывать эффект, но срок действия значительно сократится. Другие исследования показали, что активность восстановленного токсина снижается со временем, хотя через 1 неделю после разведения может сохраняться примерно 50 % исходной активности.

Изготовители могут предоставить лишь ограниченную информацию о стабильности разведённых препаратов, поэтому клиницисты выполнили многочисленные собственные исследования с целью увеличения срока годности разведённого препарата или использования альтернативных растворителей. В первую очередь эти исследования направлены на изучение возможности сохранения клинических эффектов в течение длительного времени после разведения.

Основной риск для восстановленного препарата — микробная обсеменённость, поскольку среда богата белком (ЧСА) и является питательной средой для роста микробов. Тем не менее некоторые исследования показывают, что активность ботулотоксина может сохраняться до 6 недель при хранении в холодильнике.

По материалам Доступно о пластической хирургии